Gen-silentigo: Malsamoj inter versioj

[nekontrolita versio][nekontrolita versio]
Enhavo forigita Enhavo aldonita
Sciuro23 (diskuto | kontribuoj)
Neniu resumo de redakto
Sciuro23 (diskuto | kontribuoj)
Neniu resumo de redakto
Linio 12:
 
 
La implikataj mekanismoj en la PTGS- kaj iRNA- fenomenoj havas komune nombrajn etapojn. Tiuj fenomenoj pri PTGS/iRNA ŝajnas ankaŭ ekzisti ĉe filamentaj fungoj (kiel ''Neurospora crassa''), ĉe la insektoj (drozofilo) kaj mamuloj. Ekfunkciigo de PTGS estas provokita de ĉeesto de '''dfRNA''' farita laŭ la sinsekvo de la interesa geno. Tiuj dufadenaj molekuloj estas produktataj ekde transgeno aŭ direkte injektitaj en la ĉelon. Tiuj dfRNA tiam estas digestataj en oligonukleotidojn je 20 nukleotid-paroj, nomitaj '''eiRNA''' (etaj interferaj RNA, ''angle'' siRNA ), de RNAazoRNazo specifa por dufadenaj RNA (nomita dicero ĉe animaloj). La maldirektsensignif-signifajdirektaj eiRNAoj el tiu tranĉado servas kiel gvidilo al enzima komplekso (RNA-Induktita Silentiga Komplekso aŭ '''RISK''') kiu difektas la '''mRNA''' devenanta el la interndevenaĉel-devena geno. Tiu transskribitoj-malaperigo blokas tiam la tradukadon de la korespondanta proteino. Krome, ĉe ''C. Elegans'', estis demonstrita ke maldirektsensignif-signifadirekta eiRNA povas servi kiel prajmiloj al RNA-dependa RNA-polimerazo ('''RdRP''') por la sintezo de komplementaj RNA ekde la mRNA de la interndevenaoriginala geno, pliriĉigante tiel la ĉelon je dfRNA kaj amplifante tiel la iRNA-signalon.
<br>
<br>
Linio 22:
<br>
=PTGS-fenomeno uzata kiel gen-esprim-malŝaltilo=
Tiel, oniOni povas uzi la iRNA-fenomenon kiel gen-senaktivigasilentiga tekniko relative facile uzebla, bona alternativo al gen-senaktivigo per homologa rekombiniĝo kiu daŭre validas sed nur ĉe tre malmultaj specioj. Ĉe ''C. Elegans'', sufiĉas nutri tiujn bestojn per bakterioj enhavantaj dfRNA el interesa geno por bloki, portempe kaj preskaŭ sisteme, la esprimiĝon de tiu geno en preskaŭ ĉiuj ĉeloj de la vermo. Ĉe la mamuloj, ĉeesto de dfRNA en la ĉelo induktas kutime kontraŭvirusajn respondojn kondukantaj alsekvigantaj ĝeneralaĝeneralan inhibadoinhibadon de tradukado en la ĉeloj. Tial unuaj uz-provoj de iRNA ĝenerale fiaskis. Nur la ĉeloj aŭ histoj sen tiaj reagoj (unuĉelaj zigotoj, kulturo de ne-diferenciĝintaj ĉeloj) reagis pozitive al iRNA. Tamen, antaŭ ne longe, oni sukcesis ĉirkaŭiri tiun obstaklon limigante la dfRNA-longecon je 21 nukleotidoj kun bone determinintaj strukturoj kiuj kapablas provoki iRNA-fenomenon sen indukti kontraŭvirusan reagon.
 
=Helpo kiun ofertas gen-silentigaj teknikoj en esplorado=
[[Dosiero:DfRNA.gif|thumb|left|400px|'''Figuro 2 :''' Esprimigante al plantoj apartan konstruaĵon, kiel videblas sur la bildo, iuj transgenaj organismoj kapablas mem produkti dfRNA, kiu estas difektota de dicero, post hibridiĝo kun sovaĝa ĉeldevena mRNA. Vidu figuro 1 ]]
Nune, la uzado de PTGS/iRNA-fenomenoj troviĝas strategi-meze de gravaj disvolvaj esploradoj. Ĉe iuj bestoj (precipe C. Elegans kaj [[Bananmu%C5%9Do|drozofilo]]), simpleco de la dfRNA-injekta metodo ebligis ties aplikadon en genomaj studoj, celantaj simultane kaj geno-post-gene, funkci-komprenon de genoj portitaj de tuta kromosomo (ĉirkaŭ 2500 genoj). Ĉe mamuloj, samtipaj studoj estas nun antaŭviditaj per ĉelkulturo.
 
 
Ĉe plantoj, oni disvolvis transgenajn organismojn fabrikitajn tiel ke iuj genoj transskribiĝu rekte en dfRNAon ('''vidu figuron 2'''). Tiuj transgenaj konstruaĵoj estas tre efikaj por senaktivigi la homologajn ĉel-devenajn genojn kaj tiel produkti transgenajn plantojn kun modifitaj fenotipoj kiuj povas havi agrikulturan intereson. Krome, la plej alta transform-efikeco observita ĉe la planto ''Arabidopsis thaliana'' permesas antaŭvideantaŭvidi aplikiaplikeblon tiujnde strategiojntiuj strategioj al genomikaj studoj.