Blu-blanka kribro-sistemo: Malsamoj inter versioj

[nekontrolita versio][nekontrolita versio]
Enhavo forigita Enhavo aldonita
Addbot (diskuto | kontribuoj)
e Roboto: Forigo de 3 interlingvaj ligiloj, kiuj nun disponeblas per Vikidatumoj (d:q902849)
esperantigita parametro, formatigo de titoloj, +Projektoj, kosmetikaj ŝanĝoj
Linio 1:
{{Polurinda}}
Ĉe la plasmido troviĝas geno ebliganta rezisti konstraŭ antibiotiko. Ĉiuj disvolviĝantaj bakteri-kolonioj en antibiotik-enhavanta medio estas tiuj kiuj almenaŭ posedas la plasmidon kiu povas esti sen-insertaĵa aŭ kun-insertaĵa plasmido.
Kiel fari por specife selekti la bakteriojn kiuj enhavas kaj la plasmidon kaj la insertaĵon?
Dank al la blu-blanka kribrosistemo!!
 
== Kio estas operono? ==
 
Unue kelkaj kromaj sciindaj nocioj:
Operono estas grupo de apudaj genoj kies esprimiĝo dependas de samaj promorotaj sinsekvoj kaj de samaj reguligaj sinsekvoj por ties transskribado.
 
La operono kiu nin koncernas estas la ''laktozo-operono''.
 
Tiu laktozo-operono kodas β-galaktozidazon kiu transformas laktozon en galaktozon+glukozon.
 
== Normala situacio ==
[[Dosiero:Operono_laktozo.gif|thumbeta|leftmaldekstra|400px|Konverto de laktozo en galaktozon kaj glukozon fare de β-galaktozidazo]]
 
β-galaktozidazo povas ankaŭ transformi laktozon en alolaktozon. La esprimiĝo de la laktozo-operono estas induktebla.
 
Se oni kreskigas bakterion SEN laktozo, la laktozo-operono esprimiĝas baznivele. (≈ po 5 molekuloj de β-galaktozidazo en ĉiu bakterio).
 
Se oni kreskigas bakterion KUN laktozo: la laktozo-operono esprimiĝas maksimume. La esprimiĝo-nivelo obliĝas je 1000 (de 5 molekuloj oni nun havas 5000 molekulojn). La vera induktaĵo de la laktozo-operono estas alolaktozo sed ĉar tiu molekulo ankaŭ estas substrato de la β-galaktozidazo, ties kvanto malkreskas laŭ la difekt-ago de la β-galaktozidazo.
 
== Kribra situacio ==
[[Dosiero:Operono_laktozo(Xgal).gif|thumbeta|rightdekstra|400px|Konverto de X-galaktozido en X kaj galaktozidon fare de β-galaktozidazo]]
 
[[Dosiero:Operono_laktozo(Xgal).gif|thumb|right|400px|Konverto de X-galaktozido en X kaj galaktozidon fare de β-galaktozidazo]]
Alia esprimo-induktaĵo estas IPTG (IzoPropil TioGalaktozido). Male al alolaktozo, ĝi pluigas induktadon pro sia ne-difekteblo.
Ne-natura substrato de β-galaktozidazo estas X-galaktozido kies difekto rezultas el galaktozido kaj el X kiu kolorigas bakteriojn bluen.
 
 
La plasmida tranĉejaro troviĝas en la operono de la β-galaktozidazo. La tranĉejaro-sinsekvo estas 3-multoblo tiel ke sen insertaĵo-enplasmidiĝo, transskribazo laŭlegkadre povas preterlegi sen deŝovo la β-galaktozidazo-sinsekvon.
 
== β-galaktozidaza geno tuta ==
[[Dosiero:Sola plasmido.gif|thumbeta|leftmaldekstra|400px|Efiko pri bakteri-koloro de nura fermita plasmido sen insertaĵo]]
 
Se la β-galaktozidazo-operono ne estas disrompita, β-galaktozidazo esprimiĝas kaj X-galaktozido estas difektita en X kaj galaktozidon, X estas blua produktaĵo do la bakterioj koloriĝas bluen.
Linio 45 ⟶ 43:
<br>
 
== β-galaktozidaza geno disrompita ==
[[Dosiero:Rompita plasmido.gif|thumbeta|rightdekstra|400px|Efiko pri bakteri-koloro de plasmido malfermita aŭ enhavanta insertaĵon]]
 
Se la β-galaktozidazo-operono estas disrompita de insertaĵo, β-galaktozidazo ne plu estos produktita kaj ne povos difekti X-galaktozidon aldonitan al kulturmedio. Pro tio, X kiu estas bluaĵo ne produktiĝas kaj la bakterioj gastigantaj tiun disrompitan konstruaĵon restos normalkoloraj (blankaj).
Linio 55 ⟶ 53:
Alia DNA-amplifa tekniko kiu envitre ebligas DNA-obligadon estas [[PĈR]] (polimeraza ĉen-reakcio).
 
{{Projektoj}}
[[Kategorio:Molekula biologio]]