Polimeraza ĉen-reakcio: Malsamoj inter versioj

[kontrolita revizio][nekontrolita versio]
Enhavo forigita Enhavo aldonita
de DNA-vicrivelado
ThDaniel (diskuto | kontribuoj)
Plilongigis la enkonduko per tradukado de angla Wikipedia (https://en.wikipedia.org/wiki/Polymerase_chain_reaction).
Linio 1:
[[Dosiero:Eppendorf Mastercycler Pro S.jpg|thumb|right|200px|Termociklilo por '''PĈR''' ('''PĈR-ilo''')]]
 
'''PĈR''' (''polimeraza ĉen-reakcio'') estas tekniko kiu ebligas amplifi envitre [[DNA-vicrivelado|DNA-sinsekvojn]]malgranda per ripetadokvanto de faden-plilongigajDNA, reakciojpor ĉeesterapide defari specifajmilionoj nukleotidaj [[prajmilo]]jmiliardoj kajda de [[DNA-polimerazo]]kopioj. LaPĈR malkovroestis deinventita varmoŝatantaen eŭbakterio1984 ''Thermusde aquaticus'',la kiuusona vivasbiokemiisto en[[Kary varmajMullis]] akvo-fontoj (70 ĝis 75 °C) enĉe la naciafirmao usona[[Cetus parkoCorporation]]. Yellowstone,Ĝi kajestas lafundamenta postapor uzadomulte de tiesgenetika polimerazo,testado stabilainkluzive ĝis temperaturojde proksimajanalizo de 100 °C,antikvaj estas originospecimenoj de laDNA kaj disvolviĝoidentigo de tiuinfektaj teknikoagentoj.
 
La plej multaj PĈR-metodoj dependas de termaj cikloj. Tiuj termaj cikloj ripete varmiĝas kaj malvarmiĝas la reakciilojn, ebligante temperatur-dependaj reakcioj: DNA denaturo, kaj DNA replikiĝo fare de enzimo. La principaj reakciiloj en PĈR estas [[prajmilo]]j (mallongaj unufadenaj DNA fragmentoj kiuj estas komplementa al la celita [[DNA]]-sinsekvo) kaj [[DNA-polimerazo]]. En la unua paŝo de PĈR, la du fadenoj de la DNA estas disigitaj je alta temperaturo. Tiu procezo nomiĝas DNA denaturo. En la dua paŝo, la temperaturo malaltiĝas kaj la prajmiloj ligas al siaj komplementaj [[DNA]]-sinsekvoj. La du DNA-fadenoj tiam fariĝas ŝablonojn por [[DNA-polimerazo]], kiu faras novan [[DNA]]-fadenon per kunmeto de [[nukleotido]]j (la bazaj eroj de DNA). Dum PĈR progresas, la novfarita DNA estas mem uzata kiel ŝablono por replikiĝo, ekigante reakcion en kiu la originala [[DNA]]-ŝablono estas [[Eksponenta funkcio|eksponenciale]] amplifita.
 
La malkovro de varmoŝatanta eŭbakterio ''Thermus aquaticus'', kiu vivas en varmaj akvo-fontoj (70 ĝis 75&nbsp;°C) en la nacia usona parko Yellowstone, kaj la posta uzado de ties polimerazo, stabila ĝis temperaturoj proksimaj de 100&nbsp;°C, estas origino de la disvolviĝo de PĈR. Antaŭ la uzo de tiu varmostabila polimerazo, DNA-polimerazo devis esti aldonita je ĉiun ciklon, kio estis teda kaj multekosta procezo.<ref>{{Citaĵo el gazeto | doi=10.1525/abt.2012.74.4.9| titolo=Determining Annealing Temperatures for Polymerase Chain Reaction| gazeto=The American Biology Teacher| volumo=74| numero=4| paĝoj=256–260| jaro=2012| familia nomo1=Enners| persona nomo1=Edward| familia nomo2=Porta| persona nomo2=Angela R.}}</ref>
 
Aplikoj de la tekniko inkluzivas DNA [[klonado]] por [[DNA-vicrivelado|vicrivelado]] kaj [[gentekniko]]; konstruado de DNA-bazitaj filogenioj, aŭ funkcia analizo de [[geno]]j; diagnozo kaj monitorado de [[hereda malsano|heredaj malsanoj]]; amplifo de antikva DNA;<ref>{{Citaĵo el libro | titolo=Fundamental Laboratory Approaches for Biochemistry and Biotechnology | jaro=2009| paĝoj=408-410 | eldoninto=Wiley | loko=Usono | familia nomo1=Ninfa| persona nomo1=Alexander| familia nomo2=Ballou| persona nomo2=David| familia nomo3=Benore| persona nomo3=Marilee}}</ref> analizo de genetikaj fingrospuroj, uzata ekzemple en [[krimoscienco]] kaj testado de [[parenceco]]; kaj detekto de [[Infekta agento|patogenaj agentoj]] por la diagnozo de [[infektaj malsanoj|Infekta malsano]].
 
<br clear=all>